The Knights of the Order of St. John of Jerusalem merupakan bangsawan dari keluarga paling penting di Eropa, dan misi mereka adalah melindungi Katolik dari Muslim. The Knights datang ke Malta pada 1530 setelah mereka diusir dari rumah di wilayah Rhodes oleh Turki pada 1522.
Menggunakan Malta sebagai basis baru Knights terus melawan Turki dan bajak laut Barbary. Ksatria yang jatuh selama perang Great Siege of 1565 awalnya dimakamkan di Fort St Angelo namun kemudian kembali dikebumikan di dalam Katedral St. John.